СПИНОВЫЕ ЭФФЕКТЫ В ИНГИБИРОВАНИИ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ 

(СИСТЕМА   "ДИПОЛЬ")

1. Назначение:

ингибирование репродукции ВИЧ, вирусов везикулярного стоматита и герпеса.

2. Состав Системы и принцип действия:

2.1. В основу Системы положены достижения квантовой физики последнего десятилетия и в частности трансляционные эффекты физики запутанных квантовых состояний (entangled states).

            В Систему входят: а) блок трансляции спиновых состояний, чип-транслятор, чип-индуктор, емкость с водой.

Трансляционный блок осуществляет передачу через чип-транслятор, на расстояние, спинового когерентного состояния воды. Чип-индуктор, закрепленный на емкости с водой (1,5-10 литров), принимает это состояние и переводит воду в емкости в такое же когерентное состояние. При этом, частота когерентного состояния выбирается таким образом, чтобы она соответствовала резонансной частоте воды.

2.2. После приема пациентом такой воды, вода его организма также переходит в спиновое когерентное состояние (эффект синхронизации). Это состояние удерживается в течение 2-3 минут, а затем начинается медленная спиновая декогеризация.

На графике рис. 1 приведена дисперсия разупорядочивания спиновых структур воды находящейся в исходном, когерентном, декогеризационном и инактивированном состояниях, при одновременном воздействии на нее внешнего магнитного поля и низкочастотного (до 8,2 Гц) звука. Измерения проводились с помощью аппаратно-программного комплекса "Оберон".

Рис.1

Как видно из приведенных на рис. 1 графических соотношений, наибольшая дисперсия разупорядочивания спиновых структур воды соответствует инактивированному и декогеризационному состояниям, что объясняется конверсией спиновых состояний из синглетных в триплетные с преобладанием (до 97%) триплетных.   

В основе процессов развития  вирусных инфекции в клеточных структурах организма лежат биохимические реакции, скорость которых регулируется не только ферментами, но и спиновыми состояниями реагентов.

Из спиновой химии известно, если в химической реакции сталкивающиеся молекулы имеют антипараллельные спины (синглетное состояние), образование химической связи происходит. Если взаимодействующие молекулы имеют параллельные спины (триплетное состояние), то молекула может образоваться только в триплетном, возбужденном состоянии. Поскольку такие состояния обычно лежат высоко по энергии, в подавляющем большинстве случаев химические реакции в триплетной паре невозможны.

Известно также, что химическими реакциями управляют два фундаментальных фактора -энергия и спин. При этом запрет химических реакций по спину непреодолим.

Согласно правила Вигнера статистический вес встреч двух молекул в синглетном состоянии равен 1/4, а статистический вес встреч в триплетном состоянии равен 3/4. В подавляющем большинстве случаев основное состояние продуктов химической реакции является синглетным, и поэтому следует ожидать, что только четверть встреч реагирующих молекул может дать продукт реакции.

Теперь вернемся к спиновой релаксации воды в организме пациента. Такая релаксация существенным образом влияет на процессы спинового обмена реагирующих в биохимических реакциях молекул. Это влияние возникает по двум причинам. Во-первых, связанная с релаксацией переориентация спина одной из молекул за время столкновения многократно меняется, следовательно, меняется в пространстве и направление оси, вокруг которой прецессирует спин второй молекулы. Во-вторых, выполнение z-проекции суммарного спина столкнувшихся партнеров не является уже интегралом движения, и поэтому спиновое состояние партнеров при столкновении может изменяться произвольным образом. В результате релаксации синглетные пары рекомбинируют в триплетные, а эффективность химической реакции может снижаться в 10-100 раз. Это блестяще подтвердилось в лабораторных исследованиях.  

1.3. Изучение влияния Системы “Диполь” на репродукцию вируса везикулярного стоматита.

Изучение влияния Системы “Диполь”на репродукцию вируса везикулярного стоматита (ВВС) проводили в перевиваемой культуре клеток L41 (лимфобластоидные клетки человека). Клетки выращивали в среде RPMI-1640 + 10% фетальной сыворотки + антибиотики.

Вирус везикулярного стоматита, штамм Индиана, получен из музея вирусов Института вирусологии им. Д. И. Ивановского (РАМН, г.Москва). Инфекционный титр в культуре клеток L41 составлял 4,0-4,5 lg ID₅₀

            Монослой клеток L-41 выращивали в пробирках, затем в пробирки вносили вирус везикулярного стоматита в дозе 100 ID₅₀  и клетки обрабатывали 

Системой “Диполь”.  В качестве контроля служили культуры, обработанные только ВВС и клетки, не подвергавшиеся никаким воздействиям. Через 24 часа культивирования при 37° С, когда в пробирках с контролем ВВС наблюдалась полная дегенерация монослоя клеток, в культуральной среде опытных и контрольных культур определяли инфекционный титр ВВС. Результаты исследований влияние Системы “Диполь” на репродукцию ВВС представлены 

в таблице  1.

                                                                                                          Таблица 1.

В результате проведенных исследований установлено, что Cистема “Диполь”  достоверно ингибирует репродукцию вируса визикулярного стоматита на 2 lg ID_50.

            По такой же схеме и с такой же культурой клеток изучалось влияние Системы “Диполь” на репродукцию вируса герпеса. В результате исследований установлено, что Cистема “Диполь”  достоверно ингибирует репродукцию вируса герпеса на 2 lg ID_50.  

            1.4. Изучение изменений защитных свойств клеток COS к инфекции ВИЧ под действием Системы “Диполь”.

            Изучение влияния Системы “Диполь” на репродукцию ВИЧ проводили на новой модели ВИЧ-инфекции - в клетках COS, которые имеют универсальную чувствительность к РНК и ДНК-содержащим вирусам, в том числе к ВИЧ.

Монослой клеток COS, выращенный в плашках, инфицировали ВИЧ в дозе 100 ID₅₀, культивировали на протяжении 5-7 дней, собирали культуральную жидкость и в ней определяли р24 при помощи тест-системы Virognostica Огgаnоn. Затем 10-кратными разведениями инфицировали культуру клеток COS для определения инфекционного титра. Результаты характеристики ВИЧ-инфекции представлены в таблице 2.  

                                                                                        Таблица 2

Модель СОS использовали для изучения влияния препаратов на репродукцию ВИЧ. Для этой цели монослой клеток СОS инфицировали ВИЧ в дозе 100 ID₅₀  и обрабатывали Системой “Диполь”. Инкубировали при 37° С на протяжении 7 дней, а затем в пробах определяли експрессию р24 ВИЧ и его инфекционный титр.

Результаты влияние Системы “Диполь” на репродукцию ВИЧ представлены в таблице 3.  

                                                                                            Таблица 3

В результате проведенных исследований установлено, что Система “Диполь” ингибировала репродукцию ВИЧ на 1,6 1g ID₅₀, что отразилось как на ингибиции экспрессии антигена р24 ВИЧ-1, так и на снижении инфекционного титра на 1,5 1g ID₅₀. 

            1.5. Изучение интерфероногенной активности Системы “Диполь”.

Интерфероногенную активность Системы “Диполь” исследовали в экспериментах in vitro. Для этого были использованы лейкоциты доноров человека. К 3 мл последних добавляли 0,1 мл препарата в определенной концентрации, инкубировали смесь при 37⁰ С в течение 18 часов. Затем в надосадочной жидкости определяли активность интерферона по методу подавления цитопатогенного действия вируса везикулярного стоматита в гомологичной перевиваемой культуре клеток L-41 (лимфобластоидные клетки человека). Культуру выращивали в среде роста, состоящей из питательной среды RPМI-1640 +10% фетальной сыворотки  +  антибиотики.

К монослою выращенных в плашках клеток добавляли разведение культуральной жидкости, содержащей препарат ( после инкубации с лейкоцитами) и инкубировали при 37⁰ С в течение 24 часов, после этого надосадочную жидкость удаляли и вносили вирус везикулярного стоматита (ВВС) в дозе 100 ID_50/0,1мл. В качестве контролей служили культуры клеток, обработанные ВВС и клетки, не подвергавшиеся никакой обработке. Опытные и контрольные культуры инкубировали при 37⁰ С в течение 24 часов. Определение активности интерферона осуществляли через 24 часа, когда доза внесенного ВВС вызывала полную дегенерацию клеток в контроле, при отсутствии дегенерации в интактной культуре клеток. За титр интерферона принимали величину, обратную разведению препарата, при котором культура в 50% лунок была полностью защищенной от цитопатогенного действия ВВС.

Результаты изучения интерфероногенной активности Системы “Диполь” представлены в таблице 4.  

                                                                                    Таблица 4

            Таким образом, Система “Диполь” проявляет выраженную интерфероногенную активность.

   Важнейшим вопросом в лечении СПИДа является инактивация ВИЧ.

   Известно, что геном ВИЧ, занимая определенные позиции в трехмерном пространстве хромосом клеток-хозяев, до какого-то времени не проявляют себя как патогенный фактор. В этом смысле поведение ВИЧ в организме инфицированного человека непредсказуемо. Инкубационный период ВИЧ может варьировать от недели до 10 лет. Организм и клетки их "не замечают" или даже, как в случае онкогенов, используют в благих целях как факторы роста. Почему они воспринимаемы адекватно организмом до времени "X" и семантически перерождаются, вызывая управленческую катастрофу в клетках, после времени "X"?

   Считается, что есть определенный механизм индуцирования ВИЧ инфекции из латентного "спящего" состояния. Одним из таких принципиальных механизмов можно считать цеспег^ифические реакции клеточного стресса, сопровождающиеся синтезом белков теплового шока. Убедительно показано, что тепловой шок и некоторые химические индукторы клеточного стресса, приводящие к экстренному синтезу стрессовых белков, резко активируют экспрессию длинных концевых повторов ВИЧ а культуре клеток- Более того, зона LTR ВИЧ, которая связывает белки, распознающие ДНК. оказывается гомологичной соответствующей зоне в составе генов синтеза белков теплового шока. Это указывает на отчетливую взаимосвязь экспрессии генетических элементов ретровируса (ретротранспозона?) с клеточным стрессом.

   Активация ВИЧ при клеточном стрессе может быть объяснена переходом его генома с одной поверхности потенциальной энергии на другую, что приводит к изменению спинового состояния его молекулярной структуры, увеличению количества синглетных состояний радикальных пар и инициированию реакции синтеза стрессовых белков. Такая реакция, как правило, протекает безактивационно, т.е. энергия активации реакции близка к нулю. Образующаяся молекула находится в основном электронном состоянии. Реакция протекает быстро и эффективно, если молекула имеет возможность отдать энергию, выделяющуюся при образовании связи, другим частицам или перераспределить ее между многими колебательными модами.

Как уже отмечалось, спиновая релаксация организма человека приводит к конверсии спиновых состояний из синглетных в триплетные, что обеспечивает и торможение реакции синтеза стрессовых белков. Эта же релаксация приводит к снятию клеточного стресса (энергетическая разрядка) и предупреждению активации ВИЧ.

3. Предлагаемая схема лечения СПИДа и оппортунистических инфекций: 

Схема лечения универсальна.

Пациент ежедневно осуществляет прием 150 мл когерентной воды утром и вечером за 40 минут до еды. Прием воды производится в два приема: сначала выпивается 100 мл, а затем, через 3 минуты, остальные 50 мл. Помимо приема когерентной воды, необходимо принимать препараты восстанавливающие нарушенные при СПИДе функции иммунитета.

Продолжительность лечения может составлять 1-3 месяца и зависит как от вирусной нагрузки ВИЧ, так и от оппортунистических инфекций и опухолей. 

В. Краснобрыжев, С. Рыбалко

entron@rambler.ru  

тел: (38044)4059675